本文標(biāo)題："細(xì)胞光度測量中,流式細(xì)胞光度計(jì)的原理及應(yīng)用"
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細(xì)胞光度測量中,流式細(xì)胞光度計(jì)的原理及應(yīng)用
流式細(xì)胞光度計(jì)的原理及應(yīng)用
在細(xì)胞光度測量中，近年來，流式細(xì)胞光度計(jì)(flowcytometry
，F(xiàn)CM)技術(shù)得到很快發(fā)展。流式細(xì)胞光度計(jì)(下簡稱FCM)是綜合了
單克隆抗體，免疫熒光技術(shù)、激光、微管中流動細(xì)胞的分析、微型
計(jì)算機(jī)技術(shù)等而設(shè)計(jì)制造的新型細(xì)胞光度計(jì)，有時也稱流式細(xì)胞儀
。
FCM能同時測定細(xì)胞兩個波段的熒光。當(dāng)一束聚集后的激光射
到通過流動窗(FlowChamber)的某一個細(xì)胞，光線被吸收，并產(chǎn)生
向前的及90°廣角兩個方向的散射。這兩種散射光均能被儀器檢測
到。標(biāo)記的紅或綠色熒光可分別被FCM的紅、綠熒光檢測器測定。
另外，由于散射光受細(xì)胞大小、形態(tài)、密度、熒光染色的吸收及細(xì)
胞顆粒的影響，從而使FCM能分析細(xì)胞表面特性、細(xì)胞體積、細(xì)胞
大小、多種顏色的熒光特性和熒光強(qiáng)度，分析細(xì)胞內(nèi)DNA、RNA和某
種蛋白質(zhì)的含量等。一般以向前的散射光反映細(xì)胞的大小，90°廣
角的散射光代表細(xì)胞的顆粒密度。當(dāng)同時使用這兩種散射光時，在
二維圖象上，可以將不同大小和顆粒密度的白細(xì)胞分成淋巴細(xì)胞、
單核細(xì)胞、粒細(xì)胞三群。
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